E. coli具有遗传背景清晰、细胞增殖快、成本低、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点,适用于多种蛋白的表达。大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用广泛且经济实惠的蛋白表达系统。缺点是该表达系统易形成包涵体,含有内毒素,没有翻译后修饰的加工功能。该系统适用于表达原核来源的蛋白或不需要翻译后修饰的真核来源蛋白,特别是小分子蛋白。
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CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)是研究DNA与蛋白互作的新技术。与ChIP-Seq相比,CUT&Tag不需要甲醛交联和免疫共沉淀,而是通过靶蛋白的抗体和Protein A的介导,使Protein A融合的Tn5转座酶靶向并切割DNA,同时在序列两端加上测序接头,经PCR扩增后形成高通量测序文库。
CUT&Tag(DNA-蛋白互作研究)